摘要：【目的】明確金花茶花的最佳采收期，為會(huì)花茶花的采收和綜合丌發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)?！痉椒ā繉?duì)金花茶花的花蕾期、魚嘴期、半丌期、盛丌期和凋謝期等5個(gè)小同花期的主要活性成分(總黃酮、茶多酚、總皂苷和粗多糖)和主要營(yíng)養(yǎng)成分(氨基酸、蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗纖維和灰分)進(jìn)行含量測(cè)定、比較?！窘Y(jié)果】半丌期會(huì)花茶花的總黃酮、茶多酚和總皂苷含量最高，其次為魚嘴期和盛丌期。會(huì)花茶花不同花期均含有7種必需氨基酸。魚嘴期總氨基酸含量、藥效氨基酸含量和鮮味氨基酸含量均較其他4個(gè)時(shí)期高，分別為5.46. 3.35和1.35 g·hg-1。5個(gè)小同花期金花茶花的氨基酸比值系數(shù)分( Score of amino acid ratio coefficient，SRC)分別為59.31、62.08、56.67、57.84和57.75，蛋氨酸+胱氨酸為第一限制氨基酸;魚嘴期的蛋白質(zhì)含量最高，為5.85 g·hg-1。各花期中均含有較多的纖維，含量為16.8- 17.5 g·hg-1。凋謝期脂肪的含量最高，其次是魚嘴期。各花期的灰分含量為3.64- 3.88 g·hg-1。營(yíng)養(yǎng)成分含量的因子分析綜合得分排序?yàn)椋夯ɡ倨?gt;魚嘴期>半丌期>凋謝期>盛丌期。考察不同花期金花茶花的單花重和形態(tài)表明魚嘴期和半丌期的商品性狀接近，同時(shí)產(chǎn)量較傳統(tǒng)采收期增加ll.9%?！窘Y(jié)論】魚嘴期和半丌期的金花茶花分別具有較高的活性成分含量、營(yíng)養(yǎng)成分含量和產(chǎn)量。

　　關(guān)鍵詞：金花茶花;花期;活性成分;營(yíng)養(yǎng)成分;產(chǎn)量;因子分析

　　引言

　　【研究意義】金花茶(Camellia nitidissima Chi)為山茶科( Theaceae)山茶屬(Camellia)常綠灌木或小喬木，分布于我國(guó)廣西防城金花茶國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)內(nèi)的闊葉林中，自然居群數(shù)量少，野生分布生境狹窄，是我國(guó)一級(jí)保護(hù)植物和《國(guó)際生物多樣性公約》附屬Ⅱ物種[1]，其花色金黃，形態(tài)美觀，素有“茶族皇后”“植物界大熊貓”的美稱[2]。金花茶的葉和花是傳統(tǒng)的壯族民間用藥，據(jù)《廣西民族藥簡(jiǎn)編》記載和相關(guān)臨床研究結(jié)果[3-4]，金花茶在治療月經(jīng)不調(diào)、痢疾、便血、高血壓、高血脂、腫瘤、尿路感染、咽喉炎和預(yù)防癌癥等方面具有重要作用，并已收載為新食品原料名錄。由于其具有重要的觀賞價(jià)值和一定的藥用價(jià)值，被過(guò)度開墾、濫挖濫采而嚴(yán)重破壞，人工栽培又較少，花量少，所以被視為稀缺尊貴珍品。隨著金花茶藥理和保健功效逐漸被人們認(rèn)知，市場(chǎng)需求劇增，廣西、福建、廣東等地相繼開展了引種栽培[5-7]?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】植物化學(xué)成分的積累與生長(zhǎng)時(shí)期相關(guān)，金銀花[8]、曼陀羅花[9]、紫錐菊[10]等以花入藥植物的采收期已有研究報(bào)道。金花茶花的主要化學(xué)成分除了蛋白質(zhì)、脂肪、粗纖維、氨基酸和礦質(zhì)元素等營(yíng)養(yǎng)成分以外，還含有黃酮、茶多酚、皂苷和多糖等生理活性物質(zhì)[11]，不同花期金花茶花的化學(xué)成分含量存在差異[12]。【本研究切入點(diǎn)】金花茶花期長(zhǎng)，生產(chǎn)上普遍存在為圖省時(shí)省力，待花全部開放后一次采收的現(xiàn)象，難免對(duì)金花茶花的品質(zhì)產(chǎn)生影響。因此非常有必要研究金花茶的最佳采收期。【擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題】為此本研究考察不同花期金花茶花的活性成分、營(yíng)養(yǎng)成分、產(chǎn)量和商品形態(tài)變化，從而確定了金花茶花最佳采收期，以期指導(dǎo)金花茶種植，為控制金花茶花的品質(zhì)及系列產(chǎn)品開發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

　　1材料與方法

　　1.1材料與試劑

　　供試金花茶為防城普通種金花茶(Camellianitidissima Chi，經(jīng)黃連冬高級(jí)T程師鑒定)，由福建世紀(jì)金花茶科技有限公司提供。金花茶植株花蕾在開放前，有一個(gè)較長(zhǎng)的生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期，人為地劃分為5個(gè)時(shí)期：花蕾期(花苞將開未開)、魚嘴期(花冠微微分離，可見部分花蕊)、半開期(花冠綻開至剛好可見全部花蕊)、盛開期(花冠完全綻開)、凋謝期(花冠邊緣外翻，花蕊開始凋落)(圖1)。采收后，低溫冷凍干燥，備用。粉碎，過(guò)60目篩，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

　　蘆丁(中國(guó)食品藥品檢定研究院，ID：OHZA-RZQM);人參皂苷Rgl(中國(guó)食品藥品檢定研究院，ID：TZH4-YDDW);沒(méi)食子酸(中國(guó)食品藥品檢定研究院，ID：QFFJ-8D6L);葡萄糖、乙醇、甲醇、正丁醇、福林酚、苯酚、冰醋酸、香草醛、無(wú)水碳酸鈉、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、濃硫酸、高氯酸均為分析純;實(shí)驗(yàn)用水均為蒸餾水。

　　1.2儀器與設(shè)備

　　KQ-400DE超聲波清洗儀，昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn);UV1600紫外可見分光系統(tǒng)，北京北分瑞利分析儀器有限公司生產(chǎn);R-210旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，瑞士BUCHI公司生產(chǎn);BP210十萬(wàn)分之一天平，Sartorius公司生產(chǎn);L-9100氨基酸自動(dòng)分析儀，日本日立公司生產(chǎn);K-360型凱氏定氮儀，瑞士BUCHI公司生產(chǎn)。

　　1.3試驗(yàn)方法

　　1.3.1主要活性成分含量測(cè)定 總黃酮的提取和測(cè)定：精密稱取0.5 g樣品，置50 mL錐形瓶中，加75%乙醇45 mL，超聲提取0.5 h，溫度75℃。過(guò)濾，用75%乙醇適量洗滌濾渣，濾液置于50 mL容量瓶中，用75%乙醇定容，作為總黃酮待測(cè)液。采用亞硝酸鈉一硝酸鋁一氫氧化鈉顯色法[13]，在500 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，試驗(yàn)重復(fù)4次。

　　茶多酚測(cè)定：按茶葉中茶多酚和兒茶素類含量的檢測(cè)方法[14]進(jìn)行檢測(cè)，試驗(yàn)重復(fù)4次。

　　總皂苷的提取和測(cè)定：精密稱取金花茶樣品0.5 g置于錐形瓶中，加入50 mL 75%乙醇，75℃下超聲0.5 h，過(guò)濾，濾液采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸至無(wú)醇味，轉(zhuǎn)移至分液漏斗，加入適量水飽和正丁醇萃取2次，合并正丁醇層，采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干，甲醇溶解轉(zhuǎn)移至10 mL容量瓶中，并用甲醇定容，搖勻，作為皂苷待測(cè)液。采用香草醛一冰醋酸一高氯酸法[15]，于540 nm處測(cè)定吸光度，試驗(yàn)重復(fù)4次。

　　粗多糖的提取和測(cè)定：參考張恭孝等[16]文獻(xiàn)，在總黃酮的提取基礎(chǔ)上，將提取總黃酮后的濾渣加水45 mL超聲提取th，溫度控制在75℃。過(guò)濾，用蒸餾水洗滌錐形瓶和濾渣，然后定容于50 mL容量瓶中，作為多糖待測(cè)液。采用苯酚一硫酸法[17]，于490 nm處檢測(cè)吸光度，試驗(yàn)重復(fù)4次。

　　1.3.2主要營(yíng)養(yǎng)成分含量測(cè)定 氨基酸含量的測(cè)定：按照GB/T 5009.124-2016食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中氨基酸的測(cè)定，以混合氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品為對(duì)照品，用氨基酸自動(dòng)分析儀以外標(biāo)法測(cè)定氨基酸的含量，每個(gè)樣品測(cè)定3次。

　　蛋白質(zhì)含量的測(cè)定：按照GB/T 5009.52016食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定，采用凱氏定氮法，每個(gè)樣品測(cè)定3次。

　　粗脂肪含量的測(cè)定：按照GB/T 5009.6—2016食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中脂肪的測(cè)定，采用索氏抽提法，無(wú)水乙醚為其提取劑，每個(gè)樣品測(cè)定3次。

　　粗纖維含量的測(cè)定：按照GB/T 5009.10—2003植物類食品中粗纖維的測(cè)定，用酸堿消煮法消煮樣品，進(jìn)行重量測(cè)定，每個(gè)樣品測(cè)定3次。

　　灰分含量的測(cè)定：按照GB/T 5009.4—2016食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中灰分的測(cè)定，采用馬弗爐灼燒法( 550℃)測(cè)定，每個(gè)樣品測(cè)定3次。