摘要：為探究麥蛾繭蜂成蟲的最適冷藏方式，以5 ℃作為冷藏溫度，研究了低溫馴化、冷藏方式和冷藏時(shí)間對其存活率、壽命、繁殖力、產(chǎn)卵前期、產(chǎn)卵天數(shù)和麻痹率的影響。結(jié)果表明，經(jīng)15 ℃馴化5 d后再于5 ℃冷藏，麥蛾繭蜂成蟲的壽命均顯著高于其他處理。低溫馴化冷藏和直接冷藏兩種方式均顯著延長了麥蛾繭蜂的產(chǎn)卵前期。冷藏30 d后，低溫馴化冷藏麥蛾繭蜂的存活率、麻痹率和繁殖力顯著高于直接冷藏的麥蛾繭蜂，但與對照無顯著差異，產(chǎn)卵天數(shù)在各處理間無顯著差異。因此，15 ℃低溫馴化5 d后再于5 ℃冷藏30 d是麥蛾繭蜂最適宜的冷藏條件。

　　關(guān)鍵詞：麥蛾繭蜂;低溫馴化;低溫冷藏;繁殖力

　　麥蛾繭蜂Habrobracon hebetor(Say)屬膜翅目繭蜂科，是鱗翅目幼蟲的一種重要抑性外寄生蜂，寄主包括棉鈴蟲Helicoverpa armigera(Hübner)、煙草粉螟Ephestia elutella(Hübner)等40余種夜蛾科和螟蛾科害蟲[1-3]。麥蛾繭蜂的寄生策略是先通過產(chǎn)卵器將毒液注入寄主體內(nèi)使之麻痹癱瘓，繼而選擇性地在麻痹的寄主體表產(chǎn)卵完成寄生過程[4]。因世代時(shí)間短、寄生和繁殖能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)而具有良好的應(yīng)用價(jià)值，目前麥蛾繭蜂已成功用于防治Heliocheilus albipunctella(鱗翅目，夜蛾科)、棉鈴蟲和粉斑螟Ephestia cautella等[5-7]。

　　低溫冷藏技術(shù)能顯著延長天敵昆蟲的貨架期，是生物防治中為了滿足大量釋放天敵昆蟲需要常用的方法[8]。然而，低溫冷藏會對昆蟲產(chǎn)生不良的致死和亞致死作用，甚至降低昆蟲的適合度[9]。因此，提高昆蟲對低溫冷藏的耐受性技術(shù)是現(xiàn)階段低溫冷藏工作亟需解決的問題。昆蟲的耐寒性與生物和非生物因素均有關(guān)[10]，一些研究發(fā)現(xiàn)昆蟲的耐寒性具有可塑性，在低溫冷藏前將昆蟲置于相對溫和的亞致死溫度之上進(jìn)行低溫馴化可以提高其低溫耐受性，從而提高冷藏后昆蟲的存活率[11-12]。低溫馴化按馴化時(shí)間可將其分為長時(shí)冷馴化和短時(shí)冷馴化，長時(shí)冷馴化一般馴化時(shí)間為幾周至數(shù)月不等，而短時(shí)冷馴化則僅需幾小時(shí)甚至幾十分鐘，且兩種低溫馴化方式均能提高昆蟲低溫耐受性[13-14]。如在冷藏溫度相同時(shí)，低溫馴化處理明顯提高南方小花蝽的存活率[15];低溫馴化冷藏顯著提高玉米螟赤眼蜂幼蟲寄生在米蛾卵內(nèi)的存活率和出蜂率[16]。

　　在淹沒式的生物防治中，為了獲得足量麥蛾繭蜂以滿足釋放需求，目前主要使用的方法是直接冷藏麥蛾繭蜂[17-18]，但直接冷藏會導(dǎo)致麥蛾繭蜂壽命、繁殖力和寄生能力等參數(shù)的降低。因此，為了降低直接冷藏麥蛾繭蜂導(dǎo)致的負(fù)面作用，研究提高麥蛾繭蜂耐寒性的方法是極其必要的。本文通過研究不同低溫馴化條件、冷藏方式和冷藏時(shí)間對麥蛾繭蜂生殖適合度的影響，以期篩選出麥蛾繭蜂的最佳冷藏方式，為提升麥蛾繭蜂的儲存技術(shù)提供理論參考。

　　1材料與方法

　　1.1供試蟲源

　　以煙草粉螟為寄主繁殖麥蛾繭蜂，煙草粉螟和麥蛾繭蜂均來自貴州大學(xué)昆蟲研究所。煙草粉螟用人工飼料在溫度(28±1)℃，相對濕度(75±5)%，光周期L16：D8的人工氣候箱內(nèi)飼養(yǎng)多代[19]。將200～300粒煙草粉螟卵轉(zhuǎn)移至含人工飼料約100 g的450 mL玻璃瓶中，并用80目紗網(wǎng)和開口直徑為4.4 cm的瓶蓋封口。麥蛾繭蜂用5齡煙草粉螟幼蟲飼養(yǎng)多代，挑取10頭煙草粉螟5齡幼蟲置于養(yǎng)蟲盒(直徑6.0 cm，高2.9 cm，口徑7.5 cm，盒壁用昆蟲針扎孔，下同)中，養(yǎng)蟲盒內(nèi)接入1對1～2日齡的麥蛾繭蜂成蜂后移至人工氣候箱內(nèi)繼續(xù)飼養(yǎng)，待成蟲羽化后取羽化24 h內(nèi)的麥蛾繭蜂供試。

　　1.2試驗(yàn)方法

　　1.2.1不同低溫馴化條件對麥蛾繭蜂成蟲在5 ℃下冷藏壽命的影響

　　將羽化24 h內(nèi)的麥蛾繭蜂雌雄成蟲單頭置于養(yǎng)蟲盒中分別于10 ℃和15 ℃條件下馴化0、5、10和15 d，其中0 d為對照，后置于5 ℃的低溫氣候箱內(nèi)全黑暗冷藏，每頭成蟲視為一個(gè)重復(fù)，每個(gè)處理重復(fù)30次。每天觀察麥蛾繭蜂的存活情況(用小毛筆輕觸麥蛾繭蜂無任何部位活動(dòng)為死亡標(biāo)準(zhǔn))，直至所有成蟲死亡。

　　1.2.2不同冷藏方式和時(shí)間對麥蛾繭蜂雌成蟲存活率的影響

　　根據(jù)1.2.1的試驗(yàn)結(jié)果，將羽化24 h內(nèi)的麥蛾繭蜂雌成蟲(10頭/盒)分為兩組，一組經(jīng)15 ℃馴化5 d后轉(zhuǎn)移至5 ℃條件下分別冷藏30 d和70 d，另一組無低溫馴化直接冷藏，冷藏結(jié)束后取出置于15 ℃條件下過渡12 h后檢查并記錄麥蛾繭蜂存活數(shù)。試驗(yàn)設(shè)40次重復(fù)，共1600頭雌蜂。

　　1.2.3低溫馴化冷藏對麥蛾繭蜂雌蜂適合度的影響

　　低溫馴化冷藏對麥蛾繭蜂麻痹率的影響：取1.2.2存活麥蛾繭蜂供試驗(yàn)用，將單頭麥蛾繭蜂雌蜂引入含有50頭5齡煙草粉螟幼蟲的養(yǎng)蟲盒(直徑10 cm，高8 cm;盒蓋直徑為4.5 cm，并粘貼80目紗網(wǎng))中，24 h后統(tǒng)計(jì)被麻痹的煙草粉螟數(shù)，判斷標(biāo)準(zhǔn)參照歐后丁等[19]方法進(jìn)行，即用小毛筆輕觸煙草粉螟無任何反應(yīng)視為被麻痹的幼蟲，以28 ℃飼養(yǎng)的麥蛾繭蜂為對照。

　　低溫馴化冷藏對麥蛾繭蜂壽命和繁殖力的影響：將1.2.2存活的麥蛾繭蜂雌成蟲單頭引入含有10頭5齡煙草粉螟幼蟲的養(yǎng)蟲盒中，并用20%的蜂蜜水浸濕脫脂棉后置于養(yǎng)蟲盒中供其取食。每24 h后將麥蛾繭蜂轉(zhuǎn)移至含有寄主的新養(yǎng)蟲盒中，記錄麥蛾繭蜂的產(chǎn)卵量，直至所有成蜂死亡。

　　1.3數(shù)據(jù)分析

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